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Omni-PAGE™ 预制胶 Hepes 8%,10 wells
 

 

Omni-PAGE™预制胶(Hepes-Tris
Omni-PAGE™ Hepes-Tris Gels 4℃可保存 18 个月。切勿置于 0℃以下,以免凝胶发生冻裂。
货号规格
产品组分
产品简介
Omni-PAGE™预制胶(Hepes-Tris)是一款安全、快捷、高性能的预制聚丙烯酰胺凝胶,常用于 PAGE
Western Blot 检测。本预制胶含有 1.5 cm 高度的 4%浓缩胶。丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例为 29:1
凝胶厚度为 1.5 mm, 加样孔数为 10 /15 孔,最大上样量为 60 μL/30 μL,胶板尺寸:宽×高×厚度为
98×84×4.1 mm;凝胶尺寸为:宽×高×厚度为 81×74×1.5 mm
产品特点
稳 定 性 高——采用自动化灌胶生产技术,确保了产品质量的高稳定性和重复性;
条 带 清 晰——采用玻璃胶板,有效减少蛋白非特异性吸附,使蛋白条带更为尖锐,清晰;
电 泳 快 速——电泳时间短,在 150 V 电压下,电泳 40 ~ 50 min 即可完成;
操 作 简 便——胶夹打开极为轻松,只需用刀片在胶夹一侧轻轻划一下即可打开;
产品编号 预制胶浓度 孔数 每孔最大上样量 规格
LK201 8% 10 60 μL 10 片装
LK202 10% 10 60 μL 10 片装
LK203 12% 10 60 μL 10 片装
LK204 15% 10 60 μL 10 片装
LK205 4~15% 10 60 μL 10 片装
LK206 4~20% 10 60 μL 10 片装
LK207 8~20% 10 60 μL 10 片装
LK208 8% 15 30 μL 10 片装
LK209 10% 15 30 μL 10 片装
LK210 12% 15 30 μL 10 片装
LK211 15% 15 30 μL 10 片装
LK212 4~15% 15 30 μL 10 片装
LK213 4~20% 15 30 μL 10 片装
LK214 8~20% 15 30 μL 10 片装
组分名称 数量
预制胶 10
Hepes-Tris 缓冲液粉剂 10 包(500 mL
通 用 性 强——凝胶中不含 SDS, 可用于变性和非变性电泳(需使用非变性电泳液);
兼 容 性 强——兼容市场上主流的 mini 电泳槽,如 Bio-RadInvitrogen,天能和君意东方等;
种 类 多 样——提供多种浓度的均一胶和梯度胶。均一胶可选浓度:8%10%12%15%。梯度胶可
选浓度:4 ~ 15%4 ~ 20%8 ~ 20%
使用说明
1. 请参考下面的分离谱图选择合适浓度的预制胶,以帮助您进行更好的蛋白电泳条带分离;
2. Omni-PAGE™预制胶(Hepes-Tris)从包装袋中取出,固定在电泳槽中;
3. 准备电泳缓冲液:每盒预制胶赠送 10 包电泳缓冲液粉末,每包粉末可用 500 mL 纯水进行溶解,得
500 mL 1×电泳液;
1×Hepes 变性胶电泳液参考组分为:50 mM Tris50 mM Hepes0.1% SDS2 mM EDTA
pH 7.8 ~ 8.0
4. 将电泳缓冲液注满电泳槽内槽,在外槽也加入电泳液,没过电泳槽底部的阳极即可;
: 预制胶加样孔中有残留的储存缓冲液,建议用 1 mL 移液枪吸取电泳液轻轻吹打加样孔,去除气泡
和残留的储存缓冲液,以得到最佳电泳效果。
5. 上样:将蛋白样品与 5×上样缓冲液(货号LT101 LT102)进行 4:1 混合均匀,加热处理。注意
枪头不要戳破凝胶,不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液;
6. 电泳条件:150 V40 ~ 50 min,当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束
电泳;
7. 电泳结束,取出凝胶。用刀在侧边硅胶处,沿着两片玻璃的缝隙切开硅胶,即可打开玻璃板。取胶
时,需在胶和玻璃条之间,沿着玻璃条划一刀,以防止发生粘连使胶破碎
特别注意
1 使用 Bio-Rad 电泳槽请按如下操作:
Bio-Rad Mini-PROTEAN 系列电泳槽的 U 型密封条顶部有突起结构,而雅酶 Omni-PAGE™
系列预制胶因其短玻板是凹形结构,该部位是平的,因此电泳前需将具有突起结构的密封条取出
后反向安装,使平滑面朝外,从而防止漏液(如下图所示)。具体操作如下:
a. Bio-Rad 电泳槽中的 U 型密封条(如图绿色部分)拉出,注意这时的密封条两端是有突起
的,突起的这面为正面,无突起的为反面;b. 将密封条旋转 180 度(正面朝里,反面朝外),重新装回电泳槽中,注意把密封圈周边压实,
防止发生漏液;
c. 放置好预制胶进行正常的电泳操作即可。
2 使用 Life Technology Novex 电泳槽请按如下操作:
由于雅酶 Omni-PAGE™系列预制胶比 Invitrogen NuPAGE 预制胶略薄,所以需要特制的挡板,
使得该系列预制胶能够适用于 Life Technology Novex 电泳槽。如有需要,请在订购本产品时告知,
雅酶会免费赠送该特制挡板。
 
注意事项
1. Omni-PAGE™预制胶(Hepes-Tris)使用的是中性的 Hepes 缓冲系统,请勿使用 Tris-Glycine 等其
它电泳缓冲液进行电泳;
2. 如果需要蛋白条带更加清晰、平直,可降低电压至 100 ~ 120 V, 适当延长电泳时间;
3. 电泳缓冲液不建议重复使用。因为经过电泳之后,缓冲液中的离子强度、缓冲能力都发生了变化,
不能确保电泳效果;
4. 电泳结束后可以使用 Tris-Glycine 转膜液进行转膜。将凝胶浸泡在转膜液中 10 ~ 15 min, 使凝胶中
的缓冲液得到充分平衡,再进行转膜;
5. 上样时枪头不要过度插入梳孔,以免戳破凝胶造成漏液;
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
7. 本产品仅限科研使用。
常见问题
1. 蛋白电泳示踪染料溴酚蓝扭曲、电泳时间大幅度延长:
●可能是内槽缓冲液泄漏导致。建议重新夹胶板,防止在电泳过程中内槽液面逐步降低。
2. 使用自己配制的其它体系电泳缓冲液电泳后条带较模糊:
●本预制胶为中性,对电泳缓冲液的要求比传统 pH 8.8 的分离胶要高,缓冲液配制不当,或长期放
置变质, 都会对本预制胶的蛋白电泳效果产生影响。
3. 电压为 150 V 电泳时,一块胶的电流在 80 mA 左右,2 块胶的电流在 140 mA 左右,随着时间增加
电流会逐步降低。如果电流明显不在这一范围,需检查电泳液的质量,电极是否插反及内槽电泳液
是否有漏液现象。
4. 湿转时,需 120 V 恒压转膜 60 ~ 90 min。为达到更好的转膜效果,可以根据预制胶上残留的预染蛋
白分子量标准及膜上的预染蛋白分子量标准确定转膜效率,并对转膜条件进行适当调整。目的蛋白
的分子量,凝胶浓度及转膜液中的甲醇浓度都会影响转膜效率。 大蛋白尽量选择低浓度的胶。蛋白
分子量 100 kDa 以上,建议甲醇浓度 5%10 ~ 100 kDa,建议甲醇浓度 10%10 kDa 以下,建议
甲醇浓度 20% ~ 30%
5. 电泳时泳道拖尾严重,点样孔样品滞留明显:
●可能原因是样品处理不充分:
a. 裂解处理不够充分。建议降低裂解前的样品浓度,或增加裂解液的比例,使样品充分裂解;
b. 上样缓冲液处理不充分。建议对裂解后的样品进行稀释后,再进行上样缓冲液处理。
6. 蛋白条带中间凹陷,两边突起:
●可能原因是样品盐离子浓度或表面活性剂浓度过高。建议稀释样品或对样品进行透析后,再进行
上样缓冲液处理和上样
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