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PAGE凝胶快速制备试剂盒10%
 

PAGE 凝胶快速制备试剂盒
PAGE Gel Fast Preparation Kit
本产品常温运输;保存于4℃,其中改良型过硫酸铵溶液保存于-20℃,保质期12 个月。
货号规格
PG110: 可制备125 个6%的mini 胶(0.75 mm)
PG111: 可制备125 个7.5%的mini 胶(0.75 mm)
PG112: 可制备125 个10%的mini 胶(0.75 mm)
PG113: 可制备125 个12.5%的mini 胶(0.75 mm)
PG114: 可制备125 个15%的mini 胶(0.75 mm)
产品内容
  组分名称                  体积及数量
上层胶溶液(2×)      80 ml
下层胶溶液(2×)      250 ml
上层胶缓冲液(2×) 80 ml
下层胶缓冲液(2×) 250 ml
特制染料800 μl
改良型过硫酸铵溶液8 ml
一次性配胶小杯50 个
产品特点
快速制备凝胶——最少只需2 min 的动手操作时间即可灌制多块凝胶,无需计算所需溶液量,无需稀
释;
彩色上层胶——可制备红黄蓝三种颜色的上层胶,为点样和区分不同凝胶提供最大便利;
避免异味——无需使用TEMED,避免恶臭气味;
适用小分子蛋白质——小分子蛋白质带型比在传统凝胶中表现更好。
产品简介
本产品包含制备上层胶和下层胶的预混配方,只需加入改良型过硫酸铵溶液即可凝胶,为快速制备
PAGE 凝胶提供方便,节省时间。配制一块或多块凝胶最少只需2 min 的动手操作时间。所配的上层胶带有
颜色,点样孔清晰易辨,方便点样。多种颜色设计,更易区分含不同样品的凝胶。本试剂盒灌制的凝胶也
可用于非变性PAGE 凝胶电泳。
本产品配套提供改良型过硫酸铵溶液,提高了过硫酸铵溶液的稳定性和催化效能,配胶过程中无需额
外添加TEMED。为方便吸取使用,已开盖使用中的过硫酸铵溶液可置于4℃保存。
制胶流程(以一块0.75/ 1.0/ 1.5 mm 的mini 胶为例)
1. 取等体积下层胶溶液和下层胶缓冲液混匀,即取两种溶液各2/ 2.7/ 4 ml ;
2. 往步骤1 中的混合溶液中加入40/ 60/ 80 μl 的改良型过硫酸铵溶液,混匀;
3. 将步骤2 中的混合溶液注入制胶玻璃板中(注意:此溶液为过量,请勿全部注入,可留少许于配胶
杯中,以判断凝胶状态),加入适量水或醇(如异丙醇、正丁醇等)覆盖于下层胶之上;4. 待下层胶凝固后,倒去上层水或醇;注意:当水(醇)和胶之间有一条折射线时,说明胶已凝固。
5. 取等体积上层胶溶液和上层胶缓冲液混匀,即取两种溶液各0.5/ 0.75/ 1 ml ,加入特制染料
1/ 1.5/ 2 μl(如需加深上层胶颜色,可酌情增大染料加入量,至多可加入4/ 6 / 8 μl ),然后加入10/
15/ 20 μl 的改良型过硫酸铵溶液,混匀;
注意:由于染料的特殊理化性质,使用前请摇匀。
6. 注入制胶玻璃板中,插入梳齿;
7. 待上层胶凝固后,拔去梳齿即可用于电泳。注意:请尽量使用新鲜配制的电泳缓冲液。
注意事项
1. 本产品制备出的凝胶其上层胶对样品没有浓缩效应,但是与传统PAGE 胶相比,对蛋白条带分离效
果更好,小分子量蛋白(比如10 kDa)也可以清晰地分离开,且蛋白条带更窄更锐利;
2. 改良型过硫酸铵溶液的使用量仅作参考,实际用量可根据个人实验习惯和经验调整。加入较多量的
过硫酸铵可加速凝胶,反之亦然;
3. 本产品已加入适量TEMED 的替代品,如需进一步加速凝胶,临配胶前可按需补充适量TEMED;
4. 凝胶过程中产生气泡的原因:
主要包括两个作用因素:①空气在溶液中的溶解度随着温度的降低而升高,低温储存的溶液会
溶解较多的空气;②凝胶的凝聚是一个放热反应,同时低温溶液在室温环境下缓慢吸热。
以上两者共同促成凝胶温度的升高,使得其溶解的空气因溶解度降低而释放出来,形成气泡。
因此,在配胶之前,使胶溶液及缓冲液平衡到室温(如室温放置几分钟),可有效避免凝胶中气泡的
形成;
5. 尽管整个凝胶反应是一个放热的过程,但是它包含多个步骤,最初反应的触发仍然需要较多的热能。
实验证明,凝胶速度与温度有显著的正相关性。同等条件下,温度越高,凝胶速度越快。比如25℃
时凝胶显著快于15℃。同理,在37℃时,凝胶会进一步加快;
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
7. 本产品仅限科研使用。

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