哺乳动物蛋白抽提试剂盒
Mammalian Protein Extraction Kit
本产品常温运输（其中蛋白酶抑制剂混合液需冰袋运输）；保存于室温（其中蛋白酶抑制剂混合液需保
存于-20℃），保质期12 个月。
货号规格
PC302： 100 次
产品内容

组分名称                               体积
哺乳动物蛋白抽提试剂    100 ml
蛋白酶抑制剂混合液         1 ml
产品特点
温和高效——使用温和配方保证所提取蛋白保持生物学活性，快速有效提取细胞浆和细胞核蛋白；
避免降解——带有蛋白酶抑制剂混合物，可有效避免蛋白提取过程中蛋白的降解。
产品简介
本产品能够快速、温和、高效地裂解哺乳动物细胞，有效提取细胞浆和细胞核蛋白。该试剂使用温和
配方保证所提取蛋白保持生物学活性并可应用于多种蛋白分析试验，如报告基因和酶活性测定、免疫检测、
蛋白纯化等。提取后蛋白可采用BCA 法进行蛋白定量分析。试剂盒中带有蛋白酶抑制剂混合物，可有效
避免蛋白提取过程中蛋白的降解。
使用说明
1. 在蛋白抽提前，请将试剂盒中的哺乳动物蛋白抽提试剂预冷；
2. 样本裂解
◈ 对于贴壁细胞：
(1) 小心弃去培养基，用PBS 漂洗细胞。
(2) 尽可能地弃去PBS（多余的液体将降低裂解液的浓度）。
(3) 加入适量哺乳动物蛋白抽提试剂（在抽提蛋白前2~3 min 按照1:100 加入蛋白酶抑制剂
混合液），在冰上用移液器吹打数下，使裂解液和细胞充分接触，将所有液体转入新的离
心管中。冰上孵育20 min，让细胞充分裂解（试剂使用量请参考附表1，冰上放置时间应
根据细胞类型不同进行调整）。
◈ 对于悬浮细胞：
(1) 将悬浮细胞2,500 g 离心10 min，弃去培养基。
(2) 尽可能地弃去PBS（多余的液体将降低裂解液的浓度）。
(3) 加入适量哺乳动物蛋白抽提试剂（在抽提蛋白前2~3 min 按照1:100 加入蛋白酶抑制剂
混合液），每100 mg（约100 μl）细胞至少加入1 ml 哺乳动物蛋白抽提试剂。如提取的
样本量较大，可先使用少量抽提试剂重悬细胞沉淀，然后加入剩余抽提试剂。在冰上用移
液器吹打数下，使裂解液和细胞充分接触，将所有液体转入新的离心管中。冰上孵育20 min，
让细胞充分裂解。
3. 充分裂解后，10,000~14,000 g 离心3~5 min，小心地将上清液（蛋白样品）移入新的离心管中，即
可进行后续的PAGE 凝胶电泳、Western Blot 和免疫沉淀等操作。得到的蛋白样品可分装并长期保存于-80℃。
注意事项
1. 本产品可有效裂解细胞培养板/皿培养的贴壁细胞（无需刮取）以及离心收集的悬浮细胞，较反复冻
融或超声法具有更高提取效率。但对于组织蛋白的抽提，建议使用组织蛋白抽提试剂盒（PC304）；
2. 表1 中所列的是贴壁细胞蛋白提取的最佳使用量，先收集细胞可以减少试剂用量从而获得更高的蛋
白浓度。也可以根据细胞数量估计抽提试剂的使用量。如2×106 个Hela 细胞约重20 mg，需要加
入200 μl 抽提试剂；
3. 通过本产品提取的蛋白，可通过BCA 法进行蛋白定量分析；
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；
5. 本产品仅限科研使用。