细菌蛋白抽提试剂盒
Bacterial Protein Extraction Kit
本产品常温运输（其中蛋白酶抑制剂混合液、Lysozyme 和DNaseⅠ 需冰袋运输）；保存于室温（其中蛋
白酶抑制剂混合液、Lysozyme 和DNaseⅠ 需保存于-20℃），保质期12 个月。
货号规格
PC301： 100 次
产品内容
产品特点
温和高效——使用温和配方保证所提取蛋白保持生物学活性，在抽提试剂的基础上添加了溶菌酶、DNaseⅠ
可提高蛋白提取效率并减轻因DNA 引起的粘稠现象；
避免降解——带有蛋白酶抑制剂混合物，可有效避免蛋白提取过程中蛋白的降解。
产品简介
细菌蛋白抽提试剂使用温和的非离子型去污剂，适用于大肠杆菌及昆虫细胞表达的重组蛋白提取。提
取过程中不需进行超声破碎，有效避免了外源蛋白的污染。本产品可应用于从细菌裂解液中提取可溶性蛋
白。细菌蛋白抽提试剂盒在抽提试剂的基础上添加了溶菌酶、DNaseⅠ和蛋白酶抑制剂混合物，可提高蛋
白提取效率并减轻因DNA 引起的粘稠现象，有效避免蛋白降解。所提取的蛋白保持了生物学活性，可进行
IP、Western Blot、蛋白纯化等下游操作。
使用说明
◈ 细菌可溶性蛋白提取
1. 5,000 g 离心10 min，收集菌体；
2. 可选步骤：每1 ml 细菌蛋白抽提试剂中加入1 μl DNaseⅠ（1,000 U/ml）、2 μl Lysozyme（50
mg/ml）和10 μl 蛋白酶抑制剂混合液，涡旋震荡混匀；
3. 按照每克菌体沉淀加入20 ml 细菌蛋白抽提试剂的比例，向菌体沉淀中加入抽提液，充分涡旋
或用移液器上下吹打直至菌体完全重悬；
4. 重悬后，室温孵育10~15 min（放置时间应根据细胞类型不同进行调整）；
5. 15,000 g 离心5 min；
6. 转移上清至新的离心管中（上清中即为可溶性蛋白），进行蛋白定量及下游实验。
注意：如目的蛋白以包涵体形式存在，可使用包涵体蛋白溶解液（PC401）进行溶解或优化表达条
件增加可溶性蛋白的表达。
◈ 昆虫细胞蛋白提取1. 低速离心收集细胞。每1 ml 细菌蛋白抽提试剂中加入10 μl 蛋白酶抑制剂混合液；
2. 称量细胞湿重，按10 ml/g 的量加入细菌蛋白抽提试剂（已加入蛋白酶抑制剂混合液）；
3. 重悬后，冰上孵育20 min（冰上放置时间应根据细胞类型不同进行调整）；
4. 15,000 g 离心15 min，分离可溶性蛋白。
注意事项
1. 本品采用Tris 缓冲系统，蛋白提取后的纯化操作，请使用相同的缓冲系统；
2. 使用本产品获得的蛋白裂解液，可用BCA 或Bradford 法进行蛋白定量；
3. 对于特殊的菌株，如果抽提效果不理想，可在抽提蛋白前冰冻样品；
4. 根据具体情况，可在本产品中加入蛋白酶抑制剂、盐、螯合剂、还原剂等。